অ্যাডেনোভাইরাস দ্রুত পরীক্ষা-নাকের নিঃসরণ

উদ্দেশ্যে ব্যবহার:

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড টেস্ট কিটটি নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব, অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব এবং স্পুটামে COVID-19 এর নিউক্লিক অ্যাসিডের গুণগত সনাক্তকরণের জন্য প্রয়োগ করা হয়। পরীক্ষার ফলাফলগুলি সংক্রমণ বা সন্দেহভাজন রোগীদের জন্য আণবিক নির্ণয়ের ভিত্তি প্রদান করে এবং ক্লিনিকাল রোগ নির্ণয়ের একমাত্র মানদণ্ড হিসাবে ব্যবহার করা উচিত নয়।

উপকরণ:

পরীক্ষা পদ্ধতি:

উ: নমুনা প্রস্তুতি

নিষ্কাশিত RNA হল SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড টেস্ট কিটের শুরুর উপাদান।

গুরুত্বপূর্ণ: প্রতিটি নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন পদ্ধতি অবশ্যই একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (40 μL, জীবাণুমুক্ত স্যালাইন দ্রবণ দিয়ে পাতলা করে/পিবিএস পছন্দসই পরিমাণে) এবং একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (40 μL, জীবাণুমুক্ত স্যালাইন দ্রবণ/PBS দিয়ে কাঙ্খিত আয়তনে পাতলা করে) করতে হবে।

নিম্নলিখিত বাণিজ্যিক নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন কিটগুলি ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়: PureLinkTM ভাইরাল RNA/DNA মিনি কিট (ইনভিট্রোজেন); ভাইরাল আরএনএ মিনি কিট (কিউআইজেন); TIANamp Hi-DNA/RNA কিট (TIANGEN);

B. প্রতিক্রিয়া মিক্স সেটআপ

1. সমস্ত বিকারক এবং নমুনাগুলি ব্যবহারের আগে সম্পূর্ণভাবে গলাতে হবে, সম্পূর্ণভাবে মিশ্রিত করতে হবে এবং অল্প সময়ের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় (আনুমানিক পরিসীমা 18 থেকে 25 ডিগ্রি) কেন্দ্রীভূত করতে হবে।

2. একটি উপযুক্ত আকারের পলিপ্রোপিলিন মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ টিউবে প্রতিক্রিয়া মিশ্রণের প্রয়োজনীয় পরিমাণ প্রস্তুত করুন।

3. পিপেট 25 μL বিক্রিয়া একটি উপযুক্ত অপটিক্যাল 96-ওয়েল প্রতিক্রিয়া প্লেট বা একটি উপযুক্ত অপটিক্যাল প্রতিক্রিয়া টিউবের প্রতিটি প্রয়োজনীয় কূপে মিশ্রিত করুন।

C. টেমপ্লেট সংযোজন

1. নমুনা/ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ/নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ থেকে 5 μL নিষ্কাশিত RNA যোগ করুন। মোট আয়তন 30 μL।

2. নমুনা এবং কন্ট্রোলগুলিকে রিঅ্যাকশন মিক্সের সাথে উপরে এবং নীচে/ঘূর্ণিতে পাইপিং করে মিশ্রিত করুন।

3. উপযুক্ত ঢাকনা বা অপটিক্যাল আঠালো ফিল্ম এবং উপযুক্ত ঢাকনা সহ প্রতিক্রিয়া টিউবগুলি সহ 96-ওয়েল প্রতিক্রিয়া প্লেট বন্ধ করুন৷

4. প্রায় 2500rpm এ 30 সেকেন্ডের জন্য একটি মাইক্রোটাইটার প্লেট রটার দিয়ে একটি সেন্ট্রিফিউজে 96-ওয়েল রিঅ্যাকশন প্লেটকে সেন্ট্রিফিউজ করুন।

D. রিয়েল-টাইম পিসিআর যন্ত্রের প্রোগ্রামিং

বিভিন্ন রিয়েল-টাইম পিসিআর যন্ত্রের সেটআপ এবং প্রোগ্রামিং সম্পর্কিত প্রাথমিক তথ্যের জন্য, অনুগ্রহ করে সংশ্লিষ্ট যন্ত্রের ব্যবহারকারীর ম্যানুয়ালটি পড়ুন৷ অ্যাসটি ABI7500 রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেমের জন্য অপ্টিমাইজ করা হয়েছে৷ নিচের সারণীতে বর্ণিত সাইক্লিং অবস্থার সাথে পিসিআর রান করা হয়।

ফ্লুরোসেন্স ডিটেক্টরের সংজ্ঞা দাও

*অনুগ্রহ করে যন্ত্রের ফ্লুরোসেন্স অভ্যন্তরীণ রেফারেন্সকে "কোনটি নয়" তে সেট করুন, উদাহরণস্বরূপ: ABI সিরিজের যন্ত্রগুলির জন্য "প্যাসিভ রেফারেন্স" কে "কোনটি নয়" এ সেট করুন।

E. ডেটা বিশ্লেষণ

অনুগ্রহ করে বিশ্লেষণের পরামিতি সেট করুন এবং প্রাসঙ্গিক যন্ত্রের অপারেটিং নির্দেশাবলী অনুযায়ী ডেটা বিশ্লেষণ করুন।

একটি উদাহরণ হিসাবে ABI 7500 নিন:

বেসলাইনটি এমন একটি পরিসরে সেট করা উচিত যা অ্যামপ্লিফিকেশনের প্রাথমিক চক্রে পাওয়া পটভূমির ফ্লুরোসেন্সকে বাদ দেয়, কিন্তু এটি সেই জায়গাটিকে ওভারল্যাপ করে না যেখানে পরিবর্ধন সংকেত পটভূমির উপরে উঠে যায় (শুরু মান:3~10; শেষ মান: {{2} })। সাইকেল থ্রেশহোল্ড (Ct) সূচকীয় পর্যায়ের বেসে থাকা উচিত। স্বয়ংক্রিয়ভাবে বিশ্লেষণের ফলাফল পেতে "বিশ্লেষণ" এ ক্লিক করুন এবং "রিপোর্ট" উইন্ডোতে সনাক্তকরণের ফলাফল পড়ুন।

গরম ট্যাগ: অ্যাডেনোভাইরাস দ্রুত পরীক্ষা-নাকের নিঃসরণ, চীন, সরবরাহকারী, নির্মাতারা, কারখানা, বাল্ক